PurProX®AAVPure 预装亲和纯化柱 — 工艺开发的基石

PurProX®预装柱(0.5mL/1mL/5mL)作为研发与放大之间的关键纽带。

预填有完全相同的AAVPure 亲和层析介质用于大规模生产,这些柱子有U1U2版本。其“即插即用”设计使研究人员能够绕过繁琐的装柱步骤,可直接连接至FPLC系统(例如ÄKTA),用于血清型特异性参数筛选和小规模载体生产。



PurProX®AAV 纯化解决方案transfer

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产品类型 产品货号 产品名称 规格 价格 (¥)
预装柱 GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P1ml PurProX®AAVPure 预装亲和纯化柱-1 1mL
预装柱 GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P1ml PurProX®AAVPure 预装亲和纯化柱-2 1mL
预装柱 GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P5ml PurProX®AAVPure 预装亲和纯化柱-1 5mL
预装柱 GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P5ml PurProX®AAVPure 预装亲和纯化柱-2 5mL

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AAV 亲和层析填料 GMV-PurProX-AAVPure-U-2-5L PurProX®AAVPure 亲和树脂-2 5L

技术规格


产品货号 GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P;GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P
产品名称 PurProX®AAVPure 预装亲和纯化柱
支撑基质 聚合物树脂
固定化配基 VHH
血清型亲和力 GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P: 已验证结合 - AAV2, AAV5, AAV6, AAV8, AAV7m8, AAV-DJ;
GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P: 已验证结合 - AAV9
结合载量 ~3E+14 vp/mL树脂
运输溶剂 2% 苯甲醇
平均粒径 50 µm
推荐流速 ≥3分钟保留时间
耐压性能 10bar (1MPa)
pH范围(所有配基) 2-10
操作温度 室温
储存说明 请勿冷冻

PurProX 验证数据®用于不同 AAV 血清型的 AAVPure 预装亲和纯化柱


AAV8 purified with AAV affinity resin by AKTA
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图1. 使用 AAV 亲和层析填料在 AKTA 系统上纯化 AAV8
色谱图显示了使用 AAV 亲和层析填料在 ÄKTA 系统上纯化 AAV8 血清型的过程。X 轴表示时间,Y 轴表示吸光度(A280 为蛋白质,A260 为核酸)和电导率。峰表示上样、洗涤和洗脱阶段。

Silver staining of AAV8 purification
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图2. AAV8 纯化产物的银染
银染的 SDS-PAGE 凝胶显示 AAV8 纯化组分中的蛋白条带。泳道包括分子量标记、裂解液、流穿液 (FT) 和洗脱液。衣壳蛋白 (VP1, VP2, VP3) 在洗脱液泳道中可见,分子量约为 ~60-80 kDa。

Silver staining of AAV6 purification
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图3. AAV6 纯化产物的银染
银染的 SDS-PAGE 凝胶描绘了 AAV6 纯化组分中的蛋白条带。泳道显示标记、裂解液、流穿液 (FT) 和洗脱液,其中 AAV6 衣壳蛋白 (VP1, VP2, VP3) 在洗脱液泳道中显著。

表1. 几种纯化 AAV 血清型的回收率

血清型 样品 Vg 回收率 (%)
AAV2 上样 5.72E+12 /
洗脱 5.19E+12 90.73
AAV5 上样 3.36E+13 /
洗脱 3.13E+13 93.15
AAV6 上样 8.28E+12 /
洗脱 7.73E+12 93.36
AAV8 上样 1.33E+13 /
洗脱 1.24E+13 93.67

常见问题(FAQ)

Q1: 什么是PurProX® AAVPure预装柱?

A: PurProX® AAVPure预装柱是一种即用型亲和层析柱,预先填充高性能AAV纯化树脂(AAVPure-U-1或U-2),专为小规模AAV载体纯化或工艺参数筛选而设计,无需手动装柱。

Q2: 有哪些变体可供选择,它们针对哪些AAV血清型?

答:有两种变体可供选择:
-U-1: 广谱型,适用于 AAV2\/5\/6\/8\/DJ\/7m8;
-U-2: 专为 AAV9 及其变体(例如 AAV-PHP 系列)优化。

问4:填料化学性质是否与散装 AAVPure 亲和树脂相同?

答:是的。预装柱使用与散装 AAVPure 填料完全相同的亲和介质,确保工艺同质性,并实现从研发到生产的线性放大。

问8:该柱是否可以重复使用?

答:通过适当的再生方案,可实现有限重复使用,但在小规模应用中建议一次性使用以保证结果一致性。请联系技术支持获取再生指南。

问9:它与 AAVEasy 极速离心柱有何不同?

答:AAVPure 预装亲和纯化柱需要 FPLC 系统实现精确流速和缓冲液控制,适用于工艺开发;而 AAVEasy 是基于离心的无设备工具,用于快速 <30-minute 纯化。两者填料化学性质相同,但满足不同的工作流程需求。